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    產品詳情
    • 產品名稱:流式細胞分選

    • 產品型號:
    • 產品廠商:其它品牌
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    簡單介紹:
    流式細胞分選技術是利用流式細胞分選儀,以高能量激光照射高速流動狀態下被熒光色素染色的單細胞或微粒,測量其產生的散射光和發射熒光的強度,從而對細胞的物理、生理、生化、免疫、遺傳、分子生物學性狀及功能狀態等進行定性或定量檢測的一種現代細胞分析技術,它可根據發射光的熒光強度和波長將發光顆粒亞群分開并可實現單克選,對復雜樣本中的細胞進行鑒定、分類、定量和分離,分選后的細胞能直接用于培養、植、核酸提取、單細胞PCR擴增或原位雜交等。
    詳情介紹:

    流式細胞分選


    實驗原理

    流式細胞分選技術是利用流式細胞分選儀,以高能量激光照射高速流動狀態下被熒光色素染色的單細胞或微粒,測量其產生的散射光和發射熒光的強度,從而對細胞(或微粒)的物理、生理、生化、免疫、遺傳、分子生物學性狀及功能狀態等進行定性或定量檢測的一種現代細胞分析技術,它可根據發射光的熒光強度和波長將發光顆粒亞群分開并可實現單克隆分選,能將復雜樣品中的細胞進行鑒定、分類、定量和分離,單次可同時對其中一種到四種特定細胞進行超高速分選純化、高通量單克隆分選或細胞芯片制備。分選后的細胞能直接用于培養、移植、核酸提取、單細胞PCR擴增或原位雜交等,可進一步進行細胞基因、蛋白、功能水平的研究和不同細胞之間差異研究。


    技術應用

    流式細胞分選可分選得到高純度、高活性的稀有細胞,通過直接培養、誘導、增殖、分化、活化和移植等進行更深一步的細胞功能和細胞**探索。如熒光穩轉株篩選、干細胞篩選、上皮細胞篩選、造血干細胞分選等。

    實驗步驟

    收集細胞:若為貼壁細胞,待細胞生長達到80%-90%融合后,棄掉培養液,用2ml D-PBS洗細胞,加入胰酶消化細胞,待細胞變圓后,加入培養基終止消化,收集細胞懸液至15ml離心管中;若為懸浮細胞,則吸取細胞懸液至離心管中。

    1000rpm離心5min,棄上清,加入D-PBS懸浮細胞。

    1000rpm離心5min,棄上清。

    加入500μl D-PBS懸浮細胞,分別加入抗體,4℃條件下孵育30min后,用流式分選細胞儀進行細胞分選。

    注意事項

    若分選得到的細胞需要繼續培養,則整個操作過程需要無菌。

    上機樣品為單細胞懸液。



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