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      新聞詳情

      動物實驗動物組織樣本該怎么處理?

      日期:2022-05-26 14:45
      瀏覽次數:6334
      摘要: 動物實驗動物組織樣本該怎么處理? 隨著氣溫的降低,多地迎來了降雪,那么近總是陰雨綿綿的上海會是怎么樣的呢?就在這個時候,上海達為科生物科技有限公司的實驗動物房就要竣工啦! 一、勻漿介質的制備: 一般采用pH 7.4, 0.01mol/L Tris-HCl, 1mmol/L EDTA-2Na, 0.01mol/L蔗糖,0.8%氯化鈉溶液或直接用0.86%的生理鹽水作為勻漿介質。 二、組織勻漿的制備 1、取組織塊(0.1g~0.2g)少可到2~5mg在冰冷的生理鹽水中漂洗,除去血液,濾紙拭干,準確稱重,放入5ml的勻漿管中。 2、按...

      動物實驗動物組織樣本該怎么處理?

      隨著氣溫的降低,多地迎來了降雪,那么近總是陰雨綿綿的上海會是怎么樣的呢?就在這個時候,上海達為科生物科技有限公司的實驗動物房就要竣工啦!

      一、勻漿介質的制備:

      一般采用pH 7.4, 0.01mol/L Tris-HCl, 1mmol/L EDTA-2Na, 0.01mol/L蔗糖,0.8%氯化鈉溶液或直接用0.86%的生理鹽水作為勻漿介質。

      二、組織勻漿的制備

      1、取組織塊(0.1g~0.2g)少可到2~5mg在冰冷的生理鹽水中漂洗,除去血液,濾紙拭干,準確稱重,放入5ml的勻漿管中。

      2、按重量(g):體積(ml)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(pH7.4, 0.01mol/L Tris-HCl,1mmol/L EDTA-2Na ,0.01mol/L蔗糖,0.8%的氯化鈉溶液)或者0.86%的生理鹽水于勻漿管中,冰水浴條件下,用眼科小剪盡快剪碎組織塊。

      3、勻漿的方式有多種:手工勻漿,機器勻漿,超聲粉碎。

      ① 手工勻漿:左手持勻漿管將下端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手將搗桿垂直插入套管中,上下轉動研磨數十次(6~8分鐘),充分研碎,制成10%的勻漿液。

      ② 機器勻漿:用組織搗碎機10000~15000 轉/分 上下研磨制成10%組織勻漿,也可用內切式組織勻漿機制備(勻漿時間10秒/次,間隙30秒,連續3~5次,在冰水中進行),皮膚、肌肉組織等可延長勻漿時間。

      ③ 超聲粉碎:用超聲粉碎機進行粉碎,可用Soniprep150型超聲波發生器以振幅14微米超聲處理30秒使細胞破碎,也可用國產超聲波發生儀,用400安培,5秒/次,間隙10秒反復3~5次。

            鏡檢觀察:取少量組織勻漿作涂片(直接涂片、染色均可以),顯微鏡下觀察細胞是否破碎,若沒有則可延長勻漿時間。

      4、將制備好的10%勻漿液用普通離心機或低溫低速離心機2500轉/分左右,離心10~15分鐘,取上清液進行測定.

      三、樣本保存:

            動物組織樣本暫時不測定,可立即低溫凍存,溫度越低越好,中間如不反復凍融,-20℃以下可保存三個月,-70℃以下可保存六個月。

            制備好的勻漿液建議不要凍存,好當天進行測定,如放置時間過長相關酶活會有所下降,部分指標4℃可存放3~5天(如SOD要存放2~3天,MDA可存放3~5,總蛋白測定可存5~7天等。

           上海達為科生物科技有限公司,主要致力于基因組學、轉錄組學、蛋白質組學、代謝組學、生物化學、病理檢測、基因檢測等技術在科研中的應用與推廣。通過高度細分、較好的的服務平臺,為廣大客戶提供了完善的技術解決方案和服務。


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